(57)
Реферат
Изобретение относится к области молекулярной биологии и генной инженерии. Описан Т-вектор (Т- pGEM-3zf(+)) для прямого клонирования ПЦР продуктов разного размера. Разработка Т-вектора основывалась на модификации плазмиды pGEM 3zf + путем внесения двух рестрикционных Eam1105I сайтов в сайт множественного клонирования. Расщепление по сайтам Eam1105I приводит к образованию на 5’-концах вектора свободных дезокситимидинов необходимых для клонирования ПЦР продуктов, которые содержат на своих 3’- концах свободные дезоксиаденозины добавленные Taq-полимеразой в процессе амплификации. Для оценки эффективности расщепления по Eam1105I сайтам, между данными сайтами была внесена нуклеотидная последовательность, размер которой составил 282 пары нуклеотидов. Данный вектор был апробирован путем клонирования последовательностей разного размера (2500 п.н., 750 п.н., 400 п.н.). Разработанный вектор может быть использован в клонировании амплифицированных продуктов без дополнительных модификаций с высокой эффективностью.
Название полезной модели: Т-вектор для клонирования ПЦР продуктов разного размера
Полезная модель относится к области молекулярной биологии и генной инженерии. Описан Т-вектор (Т- рОЕМ-ЗгГ(+)) для прямого клонирования ПЦР продуктов разного размера. Разработка Т-вектора основывалась на модификации плазмиды рОЕМ ЗгГ + путем внесения двух рестрикционных Еаш11051 сайтов в сайт множественного клонирования. Расщепление по сайтам Еаш11051 приводит к образованию на 5’-концах вектора свободных дезокситимидинов необходимых для клонирования ПЦР продуктов, которые содержат на своих 3’- концах свободные дезоксиаденозины добавленные Тац- полимеразой в процессе амплификации. Для оценки эффективности расщепления по Еаш11051 сайтам, между данными сайтами была внесена нуклеотидная последовательность, размер которой составил 282 пары нуклеотидов. Данный вектор был апробирован путем клонирования последовательностей разного размера (2500 п.н., 750 п.н., 400 п.н.). Разработанный вектор может быть использован в клонировании амплифицированных продуктов без дополнительных модификаций с высокой эффективностью.
(54)
Название
Т-вектор для клонирования ПЦР продуктов разного размера
(73)
Патентообладатель
Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения «Институт биологии и биотехнологии растений» Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан (KZ)